关键要点
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使用磷酸铝佐剂和IL-18联合与新城疫F基因疫苗经2次免疫的鸡群近期攻毒保护率比单用F基因疫苗的22.2%提高到了72.7%。
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该实验为NDVF基因疫苗的进一步开发应用研究展示了前景,增强了信心。
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试验结果表明磷酸铝佐剂和IL-18联合与新城疫F基因疫苗经过二次免疫鸡的近期攻毒保护率达到8/11(72.7%),比不上传统疫苗弱毒疫苗C30一次免疫88.9%,C30+灭活疫苗二免100%的保护效果。
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该实验对其他DNA疫苗的开发应用研究具有参考价值。
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磷酸铝佐剂和pcDNAcIL-18联合作NDV F基因疫苗佐剂,并经2次免疫,免疫鸡的抗体水平和近期免疫保护率都得到显著的提高。
磷酸铝与IL-18联合应用提高新城疫F基因疫苗免疫效果的研究
这一章节主要介绍了一项关于磷酸铝与IL-18作新城疫基因疫苗佐剂的研究。该研究旨在通过将传统佐剂磷酸铝与新型免疫佐剂分子IL-18联合应用,提高新城疫F基因疫苗的免疫效果。研究方法是在原有已构建好的真核表达质粒的基础上,加入适量佐剂磷酸铝,并对不同组别的鸡群进行免疫实验。最终结果显示,使用磷酸铝佐剂和IL-18联合与新城疫F基因疫苗经2次免疫的鸡群近期攻毒保护率比单用F基因疫苗提高了近4倍。虽然仍比不上传统疫苗的效果,但这项研究为NDVF基因疫苗的进一步开发应用提供了前景和信心。
研究动物病毒防治
这一章节介绍了本研究所需的主要实验材料和仪器。其中,实验材料包括pcDNA-F、pcDNA-cIL-18等DNA质粒、磷酸铝胶、DNA分子量标记、PEG8000、LiCl、乙酸铵、EDTA、Tris-Cl、NaOH、SDS、乙酸钾、冰醋酸、异丙醇等化学试剂以及NDV抗原、阳性血清、阴性血清等生物试剂。实验仪器则包括电子天平、台式离心机、水平冰冻离心机、高速离心机、恒温水浴振荡器、电热培养箱、紫外光谱仪、电热恒温水槽、多用电泳仪、组织匀浆机、PCR仪、琼脂糖凝胶电泳槽、紫外分析仪、凝胶图像分析仪、核酸与蛋白自动检测仪等。这些材料和仪器的准备对于后续的研究工作至关重要。
重组质粒的提取与纯化
这一章节主要介绍了两个重组质粒的鉴定和制备过程。首先通过PCR和双酶切鉴定来验证质粒的正确性,然后采用聚乙二醇沉淀法来进行大量的提取和纯化。在提取过程中需要经过多次离心和洗涤,并且需要注意操作环境的清洁。最后使用核酸与蛋白自动检测仪来测量质粒DNA的含量和纯度。这些步骤都是为了确保质粒的质量和可靠性,以便后续的研究工作能够顺利进行。
禽流感病毒疫苗研究及其应用
这一章节主要介绍了研究者们使用磷酸铝和pcDNA-F、pcDNAcIL-18组合疫苗的方法,并且详细说明了实验过程中分组、免疫以及免疫后HI抗体监测的具体步骤。其中,为了确保实验结果的准确性,研究人员还进行了血清制备、鸡红细胞悬液的配制以及NDV抗原HA滴度检测等操作。通过这些步骤的操作,研究人员可以更好地了解该疫苗对实验鸡的免疫效果,并进一步探究其在预防禽流感方面的应用前景。
禽流感抗体检测方法及实验操作流程
这一章节主要介绍了两种检测方法:免疫鸡血清中ND抗体的HI检验和攻毒保护试验。其中,HI检验是一种微量法,在U型反应板上进行,通过将待测血清与抗原来判断其对病毒的抑制能力;而攻毒保护试验则是通过将疫苗注射到动物体内,再进行病毒感染实验来评估疫苗的有效性。文中还详细介绍了这两种方法的具体操作步骤和判定标准。最后,文中提到了NDV强毒株F48E9半数致死量(LD50)的测定方法,用于衡量病毒的毒性强度。