关键要点
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研究使用了黄鸡作为实验对象,进行了肝细胞的分离和培养实验。
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实验采用了多种方法,包括胰蛋白酶消化、胶原酶消化、两步酶消化、肝组织块直接培养和肝组织块酶预消化培养等。
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对离体肝细胞的分离和培养效果进行了观察,并进行了肝细胞分泌功能的检测。
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实验结果表明,采用胶原酶消化的方法能够得到较好的分离效果。
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文章提供了详细的实验方法和结果分析,为相关领域的研究提供了参考。
鸡肝细胞分离与培养方法的研究
这一章节主要介绍了鸡离体肝细胞的分离和培养的研究方法以及结果分析。研究采用了多种方法分离培养鸡肝细胞,并进行了原代和传代培养,观察了细胞的生长增殖状况及形态变化,并检测了白蛋白和胆汁酸的分泌情况,以判断肝细胞的活力。其中,先0.2%胶原酶消化后0.25%胰蛋白酶加0.01%EDTA两步消化培养法的效果最好,其次是0.2%胶原酶消化培养法、0.25%胰蛋白酶加0.01%EDTA消化30min、0.1%胶原酶消化培养法、组织块0.25%胰蛋白酶预消化培养法。此外,塑料培养瓶比玻璃质地培养瓶的更利于鸡肝细胞贴壁和生长。这些研究结果对于进一步了解鸡肝细胞的生理功能及其在疾病治疗中的应用具有重要意义。
鸡胚原代培养肝细胞及其应用
这一章节主要介绍了研究者所使用的材料和方法。其中,试剂包括DMEM/F-12、胎牛血清、自制鸡胚渗出液、4%台盼蓝、胶原酶、胰蛋白酶、青霉素、链霉素等;仪器包括HZS-H水浴振荡器、Olympus IX70倒置生物显微镜、玻璃和塑料细胞培养瓶、CO2培养箱、400目细胞筛、台式大容量冷冻超高速离心机、净化工作台等;实验动物包括3日龄的粤黄鸡和8-21日龄的圩冈黄鸡。肝细胞分离方法采用了胰蛋白酶消化,并通过观察细胞分离情况及细胞形态来判断细胞活率。最后,将细胞接种于玻璃培养瓶和塑料培养瓶中,在特定条件下观察细胞生长增殖状况,并收集培养液上清检测白蛋白和胆汁酸的含量。
不同消化方法对肝组织的影响及应用
这一章节介绍了多种不同的消化方法,包括采用不同浓度的胶原酶或混合酶进行消化,并且还介绍了一种肝组织块培养的方法。其中,每一种消化方法都包含详细的实验步骤,例如消化时间和温度等参数。这些方法可以用于分离和处理肝组织样本,以便进一步研究和分析。在肝组织块培养方法中,需要观察组织块的贴壁情况以及周边细胞的增殖状况,并定期检测培养液中的白蛋白和胆汁酸含量。
鸡肝细胞分离与培养方法研究
这一章节介绍了关于鸡肝细胞分离实验的方法和结果分析。实验采用了不同的消化方法和不同日龄的鸡进行分离,并进行了传代培养。最后通过检测培养液中的白蛋白和胆汁酸含量来评估实验效果。同时,该章节还提到了影响实验效果的因素,如消化时间和消化液的选择等。
不同消化方法对肝细胞分离及培养的影响研究
这一章节主要介绍了肝脏细胞的分离方法及其影响因素。通过实验发现,使用0.2%胶原酶消化肝组织块能够获得更好的分离效果,并且相比于胰蛋白酶,胶原酶能够使细胞更长时间地存活。同时,混合酶消化法相对于单独使用胶原酶或胰蛋白酶来说,分离效果较差。而采用两步消化法则可以获得最佳的分离效果,其中先胶原酶后胰蛋白酶的方法优于先胰蛋白酶后胶原酶。经过培养后,肝细胞会逐渐形成群聚和集落生长,最终呈现出典型的上皮细胞样形态。