邓国祥论文(06-04-02).doc

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本文由华南农业大学兽医学院邓国祥等人开展的一项研究介绍了利用分子生物学方法对片形吸虫进行分类鉴定的技术。片形吸虫是一种寄生在反刍动物和人类的疾病媒介,准确鉴别其种类对于有效控制疾病的传播至关重要。过去,由于形态学鉴别的局限性,使得这一任务变得复杂。研究团队采用冷-单链构象多态性(Cold-SSCP)技术和聚合酶链反应(PCR),针对片形吸虫内部转录间隔区(ITS-1)序列进行分析。通过对中国不同地区收集的样本进行PCR扩增和冷-SSCP电泳分析,成功将样本分为两大类,对应于肝片形吸虫和大片形吸虫。此外,研究还进行了ITS-1全序列的测序分析,进一步证实了冷-SSCP的结果。这项研究不仅为片形吸虫的分子生物学研究和分类提供了新的方法,也为疾病的诊断和防控开辟了途径。

关键要点

  1. 采用PCR-SSCP方法研究了我国不同地区片形吸虫第一内转录间隔区(ITS-1)序列在片形吸虫种间、种内的变异情况。

  2. 该方法能够避免同位素的使用和X光片显影、定影等的繁复步骤,保持了PCR-SSCP的敏感性,又不存在生物安全性问题。

  3. 该研究为片形吸虫的分子鉴别提供了一种敏感、可靠、简便的方法,为片形吸虫病的鉴别诊断、分子流行病学调查以及防治等更为深入的研究奠定了基础。

  4. 研究结果表明以核糖体DNA第二内转录间隔区(ITS-1)为遗传标记,结合Cold-SSCP方法能有效地鉴定大片形吸虫和肝片形吸虫虫。

  5. 该研究为细胞水平、分子水平探讨片形吸虫的遗传变异分类提供了新的思路和方法。

片形吸虫ITS序列的多态性研究及其分子鉴定意义

这一章节介绍了一项关于片形吸虫内转录间隔区(ITS)序列的多态性研究。片形吸虫是一种寄生虫,可以感染牛、羊等反刍动物以及人类的肝胆管,导致肝脏疾病和其他症状。为了正确鉴别不同种类的片形吸虫,研究人员使用PCR技术和Cold-SSCP电泳对来自中国不同地区的片形吸虫进行了分子鉴定。结果显示,不同地区的片形吸虫属于不同的带型,分别对应着大片形吸虫和肝片形吸虫。这项研究为片形吸虫病的进一步研究和防治提供了基础。

片形吸虫PCR-SSCP技术及其在分类鉴定中的应用

这一章节介绍了片形吸虫这种寄生性蠕虫的危害及其在我国常见种类的区别。同时,由于传统形态学鉴别的局限性,近年来学者们开始从分子水平探讨片形吸虫的遗传变异分类,并且PCR-SSCP技术已经得到了广泛应用。本文作者采用Cold-SSCP方法研究了我国不同地区片形吸虫第一内转录间隔区(ITS-1)序列在片形吸虫种间、种内的变异情况,为片形吸虫的分子鉴别提供了一种敏感、可靠、简便的方法。这种方法可以避免同位素的使用和X光片显影、定影等的繁复步骤,同时保持了PCR-SSCP的敏感性,也不存在生物安全性问题。这项研究成果为片形吸虫病的鉴别诊断、分子流行病学调查以及防治等更为深入的研究奠定了基础。

研究片形吸虫样品及其检测方法

这一章节介绍了该研究所使用的材料和方法。其中,2.1节详细描述了所使用的片形吸虫样品及其来源、保存方式等信息;2.1.2节列出了所使用的各种试剂的品牌及生产商;2.1.3节列举了所使用的各种溶液及其配制方法;2.1.4节则列出了所使用的各种仪器设备的品牌及制造商。这些材料和方法的详细介绍有助于读者更好地理解该研究的过程和结果。

肝片吸虫ITS-1序列的PCR扩增及其应用

这一章节介绍了从虫体中提取 DNA 并进行 PCR 扩增的方法。首先需要对虫体进行处理和消化,然后使用特定的引物进行 PCR 扩增,得到目标片段。接下来需要进行琼脂糖凝胶电泳,检测 PCR 产物的大小和数量。最后可以进行 Cold-SSCP 分析和测序,进一步确定目标片段的序列信息。这些步骤对于研究虫体的遗传特征和生物学特性非常重要。

不同地区片形吸虫ITS-1序列PCR扩增及分析

这一章节主要介绍了对不同地区片形吸虫DNA样本进行PCR扩增的结果分析。通过使用特定引物进行PCR扩增,得到了大小约为250bp的条带,并且没有出现非特异性条带。同时,还进行了Cold-SSCP分析,将样品分为两种带型,即来自广西和贵州的样品属于一种带型,而来自南京和甘肃的样品则属于另一种带型。最后,通过对样品的ITS-1全序列进行PCR扩增并测序,得出了样品的ITS-1序列全长为422bp,其中有5个变异位点,这些变异位点可以用来区分大片形吸虫和肝片形吸虫。