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本文由谢易恒、李栋、苏培穗、莫秋女、陈锦坚五位本科生合作完成,隶属于华南农业大学的一项自然科学类学术论文。该研究旨在通过生物信息学手段,对H1N1亚型猪流感病毒广东株的血凝素(HA)基因进行深入分析,并实现其高效可溶表达。首先,利用RT-PCR技术扩增目标基因,并从生物信息学角度进行分析,深化对其结构和性质的理解。随后,通过传统实验室方法,将HA基因克隆至原核表达载体pBCX上,成功构建重组表达质粒pBCX-HA。经过转化及表达,SDS-PAGE结果显示产生了约94.0kDa的融合蛋白,且融合蛋白占菌体总蛋白的29.5%,其中90%以上的表达产物以可溶形式存在。最后,通过Western-blot方法验证了可溶表达的融合蛋白与H1N1亚型猪流感病毒之间具有良好的免疫反应性。此研究结合了传统实验室技术和生物信息学的方法,不仅为H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因的高效可溶表达提供了新策略,也对相关领域的研究具有重要的指导意义。

关键要点

  1. 研究对象:H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因

  2. 研究方法:RT-PCR和生物信息学分析

  3. 结果:成功构建重组表达质粒pBCX-HA并进行高效可溶表达

  4. 表达产物:占菌体总蛋白的29.5%,90%以上是以可溶形式表达的

  5. 免疫反应性:可溶表达的融合蛋白与H1N1亚型猪流感病毒阳性血清具有良好的免疫反应性

H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因的高效可溶表达及生物信息学分析

这一章节介绍了一篇关于H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因的生物信息学分析和高效可溶表达的学术论文。该论文采用了RT-PCR方法扩增了H1N1亚型猪流感病毒广东株的血凝素HA基因,并从生物信息学角度分析了其结构性质。在此基础上,利用传统的实验室方法将HA基因克隆到原核表达载体pBCX上,并成功构建了重组表达质粒pBCX-HA。最终,该研究在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中表达了可溶性的融合蛋白,并通过Western-blot证实了其与H1N1亚型猪流感病毒阳性血清具有良好的免疫反应性。这篇论文结合了传统实验室方法和生物信息学技术,对于相关课题的研究具有重要的指导意义。