关键要点
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研究了我国片形吸虫基因组DNA多态性情况。
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采用RAPD方法扩增结果因总DNA的序列变异而呈现多态性。
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利用不同引物进行了扩增,并进行了数据分析。
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发现有22条引物不能对肝片吸虫、大片吸虫的其中一种或两种DNA得到扩增。
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该研究可为片形吸虫DNA多态性的鉴定提供基础数据。
片形吸虫基因组DNA多态性研究
这一章节介绍了一项关于片形吸虫基因组 DNA多态性的研究。片形吸虫是一种寄生在反刍动物体内的寄生虫,会对宿主的肝脏和肠道造成机械性损害,并分泌毒素导致机体呈现中毒现象。传统的形态学分类方法难以鉴别某些虫种,因此近年来出现了一些分子生物学手段,如 RAPD,但这些方法操作困难,费用昂贵,难以推广。本文使用 RAPD 方法对片形吸虫基因组 DNA多态性进行研究,旨在明确我国片形吸虫基因组 DNA 多态性情况,为分子生物学和分子遗传学的研究奠定基础。该研究采用了随机扩增多态性DNA(RAPD)方法,以10bp左右的短寡核苷酸为引物的PCR反应,扩增结果因总DNA的序列变异而呈现多态性,具有个体特异性。该技术可以在片形吸虫的亲缘种及未知近缘种的识别上有应用。
片形吸虫病的危害与鉴别方法
这一章节主要介绍了片形吸虫这种寄生虫的危害及其种类鉴别的重要性。片形吸虫可以导致肝炎、胆管炎、肝硬化等疾病,对家畜的生长发育和生产性能都有很大影响,同时也对人类健康构成威胁。其中肝片吸虫和大片形吸虫是主要的寄生虫种类,它们虽然形态相似,但在生物学特性方面存在差异。为了更好地防治片形吸虫病,需要进行正确的种类鉴别。而随机扩增多态性DNA技术是一种常用的DNA分析方法,可以通过PCR扩增得到不同样本之间的DNA片段差异,从而实现物种鉴别的目的。
研究不同地区片形吸虫样品的随机引物筛选和应用
这一章节介绍了实验所使用的材料和方法。其中,虫株来自南京、广西、甘肃、贵州等地,使用了40条随机引物进行实验。试剂包括蛋白酶K、DNA抽提试剂、PCR试剂、电泳试剂等,并且还提供了其他生化试剂。在本实验中,作者采用了生物技术公司提供的试剂,如Merk公司的蛋白酶K和TaKaRa公司的Taq酶。同时,作者也提供了详细的实验步骤和操作流程,方便读者理解和实践。
实验方法:DNA提取及纯化
这一章节介绍了实验所使用的仪器设备和方法步骤。其中包括了数显三用恒温水箱、旋涡混合器、台式离心机、电子天平等多种仪器设备,以及肝片吸虫与大片吸虫 DNA 的提取方法。具体操作包括虫体的处理、基因组 DNA 的抽提和纯化等步骤。最后,提取出的 DNA 溶液需要转移到离心管中,并保存在 -20℃环境中。这些信息对于进行类似实验的同学来说是非常有用的参考。
利用PCR技术鉴定DNA种类的方法及应用
这一章节介绍了如何通过PCR的方法鉴定提取的DNA种类,并给出了扩增不同吸虫的引物序列以及扩增体系。接着,介绍了如何进行PCR反应并给出反应条件。最后,介绍了如何通过0.8%琼脂糖凝胶电泳观察PCR产物的结果来判断DNA种类。