结题书修改版(刘亿云).doc

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本文报道了一个针对口蹄疫病毒(FMDV)的大学生科技创新活动项目,旨在通过基因工程技术,利用PCR扩增获得VP1基因免疫活性串联片段FB,并通过同源重组的方式将其与T4噬菌体的小外壳蛋白基因(SOC)融合,最终在T4噬菌体表面展示出来。该项目不仅探索了FMDV免疫原性研究的新方法,也为口蹄疫基因工程疫苗和诊断试剂盒的研发奠定了基础。研究首先通过PCR扩增获取VP1基因免疫活性串联片段FB,并克隆到T4噬菌体展示系统pSOC质粒中,通过同源重组技术将其整合至T4噬菌体基因组中,从而在T4噬菌体表面展示该免疫活性片段。实验结果显示,展示的融合蛋白具有良好的免疫原性,能够与FMDV特异抗血清发生特异性反应。此外,项目还构建了基于此重组噬菌体的ELISA方法,成功实现了对FMDV抗体的有效检测,为口蹄疫的快速准确诊断提供了新的思路。整个研究过程中,团队成员在指导教师的带领下,不仅增强了实验技能和理论知识,还锻炼了解决问题的能力,为未来的科学研究工作奠定了坚实的基础。

关键要点

  1. 研究项目名称:FMDV免疫活性串联片段在T4噬菌体表面的展示

  2. 项目起止时间:2005.5-2006.3

  3. 项目经费:1500元

  4. 项目组成员包括刘忆云、冯凯玲和廖为仪等

  5. 研究重点:采用PCR方法获得口蹄疫结构蛋白VP1基因免疫活性串联片段FB,并将其展示在T4噬菌体表面,用于研究重组噬菌体的免疫原性和为下一步口蹄疫基因工程疫苗及诊断试剂盒的研制打下良好基础。

华南农业大学大学生科技创新项目结题报告

这一章节是一份华南农业大学大学生科技创新活动项目的结题报告书。该项目名为“FMDV免疫活性串联片段在T4噬菌体表面的展示”,由刘忆云、冯凯玲、廖为仪三位同学共同完成。项目主要目的是通过对口蹄疫结构蛋白VP1基因免疫活性串联片段FB的PCR扩增,并将其与SOC基因融合展示在T4噬菌体表面,来研究重组的噬菌体免疫原性,为下一步口蹄疫基因工程疫苗及诊断试剂盒的研制提供基础。该项目获得了1500元的经费支持,指导老师是马静云副教授,项目周期为2005年5月至2006年3月。

口蹄疫病毒基因工程疫苗及其诊断方法的研究

这一章节主要介绍了项目的具体内容和实施方案,包括合成口蹄疫病毒 VP1 基因免疫活性串联片段、将其克隆到T4 噬菌体展示系统 pSOC 质粒中、通过同源重组的方法将免疫活性串联片段重组进T4噬菌体基因组中、以纯化重组 T4噬菌体作抗原对其进行免疫原性研究等内容。同时,也提到了项目的研究过程和资料查阅情况,以及项目研究成果的完成形式和价值。最后,还有关于经费使用情况和项目完成后的认识总结等方面的介绍。

口蹄疫病毒免疫活性串联片段在T4噬菌体表面的展示

这一章节介绍了口蹄疫病毒的基本信息,包括病原体的类型、传播途径、预防措施等。还详细阐述了口蹄疫病毒的结构和特点,特别是关键性抗原表位的位置和作用。最后,介绍了利用T4噬菌体表达系统的原理和技术路线,通过展示口蹄疫结构蛋白VP1基因免疫活性串联片段FB来制备重组的T4-FB噬菌体,为后续的口蹄疫基因工程疫苗及诊断试剂盒的研发提供了基础。

实验材料与方法介绍

这一章节主要介绍了实验所需的材料和试剂,包括质粒、血清、酶类和其他试剂等。其中,MB质粒是含有FB片段的质粒,pSOC质粒是含有T4噬菌体小外壳蛋白基因soc的原核表达质粒,而pR质粒则是T4噬菌体整合质粒。此外,还介绍了不同种类的培养基及其制备方法,如LA液体培养基、SC培养基和M9S培养基等。这些材料和试剂都是进行实验所必需的,它们的质量和纯度对于实验结果有着重要的影响。

SDS-PAGE电泳与Western Blot试剂及其应用

这一章节介绍了实验所需的化学试剂和仪器设备,并详细说明了每种试剂的配制方法和储存条件。其中,SDS-PAGE电泳试剂是进行蛋白质分离的重要试剂之一,而Western blot试剂则是检测蛋白质表达量的关键工具。此外,该章节还提到了一些常用的仪器设备,如PCR Express Gradient PRC、凝胶成像系统等,这些设备对于实验的成功进行至关重要。