关键要点
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研究了一种名为MfCOR1的基因，在低温胁迫下可以提高植物的抗寒性。
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通过转基因技术使MfCOR1在烟草中过量表达，成功地培育出了转基因烟草。
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对转基因烟草进行了抗寒性、生长状况及光合速率的分析，证明MfCOR1能够显著提高植物的抗寒性和光合速率。
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MfCOR1定位在叶绿体基质中，可能对CO2同化过程或关键酶起调节作用。
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这项研究为进一步研究MfCOR1在植物抗寒性中的作用提供了基础，也为作物抗逆基因工程育种提供了新的思路。
超表达MfCOR1提高转基因烟草抗寒性和生物量
这一章节介绍了一项关于黄花苜蓿的研究，研究人员从黄花苜蓿响应低温的cDNA消减文库中选取了一个cDNA片段，并将其克隆成全长605bp的基因，该基因被命名为MfCOR1。该基因高度亲水，N-端含有叶绿体信号肽，推测其存在于叶绿体基质中。研究人员通过半定量RT-PCR技术分析了该基因在低温胁迫下的表达规律，并发现其在低温处理后能够持续高效表达，初步证明MfCOR1是一个低温诱导基因。随后，研究人员构建了超表达载体pBI-MfCOR1，并通过农杆菌介导法转化烟草获得了转基因植株。最后，研究人员比较测定了低温胁迫对转基因植株和野生型对照的影响，发现转基因株系在冷、冻胁迫下相对电导率的升幅和在冷胁迫下净光合速率的降幅均低于野生型，表明显著提高了抗寒性，同时转基因株系在正常生长条件下苗期生物量也显著增大。这项研究表明，MfCOR1是一个新的耐寒基因，可能参与叶绿体光合作用，提高植物的光合速率，促进苗期的生物量积累，具有很大的应用潜力。
MfCORI基因过量表达改善烟草耐寒性和生物质生产
这一章节介绍了一项关于MfCOR1基因的研究，该基因来自一种名为Medicago falcata的植物，该植物对低温有很强的耐受性。研究人员通过建立一个低温应答基因的cDNA文库，筛选出MfCOR1基因，并对其进行了序列分析和表达模式研究。他们通过转基因技术将MfCOR1基因导入到烟草中，并对其进行了抗寒性和生长状况等方面的测试。结果表明，MfCOR1基因可以显著提高烟草的抗寒性和生物质积累率，因此被认为是一种具有潜力的作物抗逆基因。这项研究为进一步探索植物耐寒分子机制提供了新的思路和方法。
黄花苜蓿低温胁迫响应研究
这一章节主要介绍了研究者使用黄花苜蓿品种呼伦贝尔种子进行实验的过程。首先，种子经过60℃热水浸泡后，在28℃黑暗条件下催芽，然后在温室中培养并进行低温处理。接着，对处理后的样品进行了总RNA的提取和cDNA第一链的合成。最后，通过甲醛变性胶电泳来检查RNA的完整性和测定其浓度与纯度。这些步骤都是为了保证后续实验的准确性和可靠性。
黄花苜蓿低温响应基因MfCOR1的克隆、测序及半定量RT-PCR研究
这一章节介绍了如何从黄花苜蓿响应低温的cDNA消减文库中获取MfCOR1cDNA序列，并且使用Seqman工具进行了序列拼接，最终得到了该基因的全长序列。接着，通过DNAStar软件分析了该序列的开放阅读框，并根据其两端的序列设计了上下游引物。然后，使用Ex Taq DNA聚合酶进行了PCR扩增，获得了MfCOR1cDNA全长，并将其与pMD20-T载体连接，转化大肠杆菌DH50菌株，筛选重组子。最后，通过半定量RT-PCR检测了MfCOR1的mRNA丰度。
植物基因工程研究中的PCR扩增、载体构建和农杆菌介导转化技术
这一章节主要介绍了植物基因工程中的两个重要步骤：植物表达载体的构建和农杆菌介导法转化模式植物烟草。其中，通过设计引物、PCR扩增、凝胶回收等技术手段，将目标基因克隆到植物表达载体中；而通过农杆菌介导法，可以将表达载体导入到植物细胞中实现基因的表达。此外，文中还详细描述了烟草无菌苗的培养、农杆菌的活化与悬浮、侵染、共培养以及抗生素筛选等过程，为读者提供了完整的实验操作流程和技术细节。这对于想要深入了解植物基因工程技术的学生来说是一篇非常重要的参考资料。