关键要点
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广东省阳东县马铃薯种植出现典型卷叶病毒病症状
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通过RT-PCR技术和克隆分析，确认病原体为马铃薯卷叶病毒（PLRV）
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建立了PLRV的RT-PCR检测方法
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阳东县种薯带病毒情况得到检测
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种薯带毒是PLRV主要传播方式之一
马铃薯卷叶病毒的RT-PCR检测及其应用
这一章节介绍了一项关于广东省阳东县马铃薯病毒病的研究成果。该研究采用了RT-PCR技术对病叶组织中的总RNA进行扩增，并通过克隆和序列分析确认了其为马铃薯卷叶病毒（PLRV）的外壳蛋白（CP）基因。同时，该研究还设计并合成了一组引物，用于对PLRV进行快速检测。最终，通过对该县种薯进行RT-PCR检测，发现其中有60%的种薯带有PLRV，从而证实了种薯带毒的事实。这项研究成果对于马铃薯生产具有重要意义，可以为农民提供更加有效的防治手段。
广东阳东县马铃薯病毒病田间调查与分析
这一章节主要介绍了作者对广东省阳东县大沟镇、雅韶镇等地种植马铃薯的田间病情调查情况。通过对病株的症状表现、田间分布以及不同田块株发病率等方面的研究，得出了这些地区马铃薯病毒病的发生情况。其中，病株表现为黄化、矮化、僵直等症状，且田块内随机分布，无明显发病中心。同时，田块间的发病率差异主要由肥水管理差异所致。通过该研究可以更好地了解马铃薯病毒病的情况，并采取相应的防控措施。
广东阳东县马铃薯卷叶病毒病初步诊断
这一章节主要讲述了对广东省阳东县马铃薯卷叶病毒的初步诊断以及后续的病毒基因分析和种薯带毒分子检测试验。通过对田间调查结果的分析，初步判断马铃薯卷叶病毒是由马铃薯卷叶病毒（PLRV）引起的。然而，由于PLRV无法经机械摩擦传播且寄主范围较窄，难以进行鉴定。因此，作者采用了病毒基因克隆和序列分析的方法来确定病原并获取更详细的资料。在实验过程中，作者利用已报道的PLRV基因组序列，在病毒CP基因两侧设计和合成了DNA引物，用于扩增PLRV CP基因，预期扩增DNA片段长度为960bp。
RNA提取和RT-PCR反应操作流程
这一章节介绍了如何从病株上部初卷叶片中提取总 RNA，并采用了 UNOQ-10 柱式 Trizol 总 RNA 抽提试剂盒来进行操作。具体步骤包括剪取叶片、加入 Trizol 溶液、离心、加入无水乙醇等过程。最后得到的 RNA 样品液可以用于后续实验，如 RT-PCR 反应。在 RT-PCR 反应中，需要使用 TaKaRa one step RNA PCR kit 进行反应，同时加入引物 P1 和 P2，以及一些其他的反应成分。整个反应过程中需要注意温度和时间的控制，最终可得到目标 DNA 片段。
马铃薯卷叶病毒外壳蛋白基因克隆与测序
这一章节介绍了RT-PCR反应产物的电泳和回收方法，以及产物的克隆和测序过程。通过RT-PCR反应可以获得预期大小的DNA电泳带，而不同的样品电泳带强弱可能存在差异。实验结果显示，RT-PCR产物全长为960bp，经过克隆后测序得到的序列可以推导出一种627bp的开读框，产生了208个氨基酸残基的蛋白质产物，即马铃薯卷叶病毒外壳蛋白基因。