L05084朱睿-结题论文.doc

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本文报道了一项研究,旨在探索海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(IPSAC)催化的内吗啡肽-1(一种具有镇痛效果的神经肽)的合成方法。该研究首先介绍了内吗啡肽的重要性和应用前景,随后详细叙述了利用IPSAC固定化木瓜蛋白酶在乙腈介质中合成Trp-Phe-NH,二肽及其进一步转化为Tyr-Pro-Trp-Phe-NH,四肽的过程。通过正交试验优化了反应条件,包括pH值、离子强度、反应时间和固定化酶用量等因素,结果显示,最佳反应条件为乙腈介质中,pH 6.0,离子强度0.4 mol/L,反应温度30℃,固定化酶用量6 g,反应时间12小时,对应的合成产率分别为Trp-Phe-NH,二肽的27.8%和Tyr-Pro-Trp-Phe-NH,四肽的35.2%。此外,还进行了动力学测定,得出Trp-Phe-NH,二肽的Km为3.17 mmol/L,Vmax为3.90 mg/mL·h。这项研究为高效、低成本生产内吗啡肽提供了实验基础,为进一步研究和开发新型镇痛药物开辟了道路。

关键要点

  1. 研究使用IPSAC作为催化剂,探索Tris-Maleate缓冲液的pH、离子强度、反应温度、反应时间和酶用量等因素对内吗啡肽合成的影响。

  2. 在实验中成功合成了Trp-Phe-NH二肽和Tyr-Pro-Trp-Phe-NH四肽,并对其进行了HPLC和质谱检测。

  3. 实验发现,离子强度、反应时间、溶液含量、反应温度和IPSAC用量对Trp-Phe-NH的合成有影响,其中IPSAC用量对合成影响最小。

  4. IPSAC催化合成Trp-Phe-NH二肽的Km为3.17mmol/L,Vmax为3.90mg/mL·h。

  5. 在以乙腈为有机介质的反应体系中,IPSAC催化合成Tyr-Pro-Trp-Phe-NH的产率为35.2%。

海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶合成内吗啡肽的方法研究

这一章节介绍了关于内吗啡肽的研究及其应用前景。内吗啡肽是一种存在于人体内的神经肽,能够缓解疼痛并调节痛觉信息的传递。本文研究了利用酶法制备内吗啡肽的方法,并探索了反应条件对其影响。酶法制备内吗啡肽的优点包括反应条件温和、立体专一性强、不易发生副反应等。该研究结果有望为寻找治疗疼痛和系统疾病的新药物提供依据。

制备海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶及其应用研究

这一章节主要介绍了研究者在实验过程中所使用的材料和方法。其中,他们使用了PA粗酶和壳聚糖作为材料,并且通过一系列步骤制备了海藻酸钠-壳聚糖固定化的木瓜蛋白酶(IPSAC)。此外,该研究还详细描述了如何合成Boc-Trp-Phe-NH,以及如何脱去其Boc基团。最后,研究者还介绍了他们使用的实验设备和分析方法。这些细节对于理解研究者的实验过程非常重要。

IPDAC催化Trp-Phe-NH,二肽的合成及优化条件研究

这一章节介绍了IPSAC催化合成Trp-Phe-NH二肽的方法和条件优化过程。通过对不同因素如pH、离子强度、反应时间等的影响研究,确定了最佳方案为在乙腈中加入0.4mL 0.4mol/L pH 6.0 Tris-Maleate缓冲液,反应温度为30℃,固定化酶用量为6g,反应时间为12h。最终得到Trp-Phe-NH二肽的产率为27.8%。

IPSAC催化合成Trp-Phe-NH二肽动力学及产物分析

这一章节主要介绍了IPSAC催化合成Trp-Phe-NH,二肽的动力学实验结果,并给出了相关数据和图表。实验结果显示,IPSAC用量对Boc-Trp-Phe-NH,的合成影响最小,而pH对Trp-Phe-NH的合成影响最大。此外,该实验还提供了Km和Vmax等重要参数,可用于进一步研究IPSAC催化合成二肽的过程。

IPSAC催化合成Tyr-Pro-Trp-Phe-NH

这一章节介绍了使用IPSAC催化合成Tyr-Pro-Trp-Phe-NH的过程。该实验采用Boc-Tyr-Pro-oMe和Trp-Phe-NH作为原料,在乙腈作为有机介质的情况下进行反应。最终,实验获得了35.2%的合成产率。这个过程可能需要在实验室中进行,并且需要一定的化学知识和技能才能完成。